兔角膜內(nèi)皮細(xì)胞是位于兔眼角膜內(nèi)層的單層細(xì)胞,構(gòu)成后彈力層與房水之間的物理屏障,通過離子“泵”功能調(diào)節(jié)角膜水分和離子濃度,維持角膜透明度和正常生理功能。
兔角膜內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞功能:
維持角膜透明度:通過離子“泵”功能(如Na?-K?-ATP酶活性),調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分,維持角膜半脫水狀態(tài),保證正常厚度和透明度。若功能紊亂,會導(dǎo)致角膜水腫,甚至失去透明性。
屏障作用:構(gòu)成后彈力層和房水之間的物理屏障,防止房水過度滲入角膜基質(zhì)層。
合成蛋白功能:角膜作為無血管組織,其透明性依賴于內(nèi)皮細(xì)胞合成的多種蛋白。
細(xì)胞培養(yǎng)與應(yīng)用
培養(yǎng)方法:通常采用混合膠原酶消化結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基進(jìn)行篩選制備。細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等病原體。
培養(yǎng)條件:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)或明膠(0.1%)。
培養(yǎng)基:含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等。
換液頻率:每2-3天換液一次。
生長特性:貼壁生長,細(xì)胞形態(tài)呈內(nèi)皮細(xì)胞樣。
傳代特性:可傳代2-3代,傳代比例為1:2。
消化液:0.25%胰蛋白酶。
培養(yǎng)環(huán)境:37℃、5% CO?、飽和濕度。